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Princípios de espectroscopia de fluorescência 5

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Princípios de espectroscopia de fluorescência

20/10/2026

Aplicações envolvendo espectroscopia de fluorescência

Quantificação de cumarina

Legalmente, uma pequena quantidade de cumarina (especificada por país) deve ser adicionada ao querosene de maneira a distingui-lo do óleo diesel. De maneira a prevenir a produção ilegal de óleo diesel, um método analítico padronizado para a determinação quantitativa de composição de cumarina utilizando espectroscopia de fluorescência foi desenvolvido (Japan Petroleum Institute Standard: JPI-5S-71-2010). A cumarina é primeiro hidrolisada em uma solução alcalina, este produto é subsequentemente isomerizado para a orientação “trans”, através do emprego de radiação UV (figura 11).

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As amostras resultantes são analisadas através do emprego de um espectrofluorímetro. Curvas de calibração são obtidas através da utilização de uma amostra em “branco” e padrões contendo concentrações de cumarina com composição de 0, 20, 40, e 80%, com coeficientes de correlação de 0,9996 (figura 12). O desvio padrão entre medidas práticas e teóricas foi de 0,65%. O limite de detecção deste método foi de 2,1% e o limite inferior de quantificação foi de 6,5%.

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Medições de reflectância utilizando espectrofluorímetro

 

A dificuldade de medições de reflectância em amostras fluorescentes utilizando um espectrofotômetro UV/Vis é bem discutida na literatura. Isto ocorre porque a luz detectada contém fluorescência como componente, de maneira que o espectro de absorção verdadeiro não pode ser obtido. Por outro lado, utilizando um espectrofotômetro e um sistema de varredura sincronizada de modo que a diferença entre comprimentos de onda de emissão e excitação seja zero, de modo a obter valores verdadeiros de transmissão e reflectância.

A figura 13 apresenta o espectro de reflectância de um cartão vermelho fluorescente. Quando uma amostra não emite fluorescência, pode-se observar perfis similares entre os resultados dos diferentes equipamentos, porém é possível perceber que algumas zonas apresentam discrepâncias de perfil, demostrando a necessidade de utilização de um espectrofluorimetro para este tipo de procedimento.

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Medições de fosforescência

A fosforescência, devido a cruzamentos intersistêmico, tem um tempo de vida maior que a fluorescência e pode ser medida através da interrupção da fonte de luz de excitação. Caso haja a possibilidade de extinção por oxigênio ou devido à efeitos térmicos, relacionados ao solvente, é possível empregar um sistema de resfriamento à base de nitrogênio líquido
(figura 14).

Muitas pesquisas relacionadas a materiais que emitem fosforescência em temperatura ambiente têm sido realizadas, sendo pigmentos eletroluminescentes um exemplo.

https://www.jasco-global.com/principle/principles-of-fluorescence-spectroscopy-5-applications-of-fluorescence-spectroscopy/